抗氧化劑是指能防止或延緩食品氧化,提高食品的穩定性和延長貯存期的食品添加劑。GB5009.32-2016《食品安全國家標準 食品中9種抗氧化劑的測定》中采用GPC和C18小柱對食品中9種抗氧化劑進行前處理,該方法回收率低,測試結果不穩定。山東譜析公司優化了實驗方法,用CNW Poly-Sery PSD SPE小柱進行前處理,克服了國標方法的缺點,方法簡單,9種抗氧化劑的回收率均在90%以上。
 
一、樣品前處理
 
1、植物油基質:準確稱取混合均勻的試樣1g(極ng確至0.01 g)于50mL離心管中,加入3mL乙腈飽和的正己烷溶液溶解樣品,渦旋1min,靜置10min,用3mL含AP的正己烷飽和的乙腈溶液渦旋提取2min,3000r/min離心5min,收集乙腈層于另一50mL離心管中,再重復使用3mL含AP的正己烷飽和的乙腈溶液溶液提取4次,合并5次提取液,待上樣。(提取次數對BHT的回收率影響很大)
 
含AP的正己烷飽和的乙腈溶液:1L正己烷飽和的乙腈中溶解0.1gL-抗壞血酸棕櫚酸酯(AP)
 
2、植物油基質加標:在樣品中加入標準溶液(1000ppm,100ul,使上機檢測濃度為50ppm),其它操作同樣品空白。
 
二、小柱操作
 
SBEQ-CA3554 CNW Poly-Sery PSD SPE小柱 500mg/6ml
 
小柱上端預裝2g 無水硫酸鈉
 
活化:5ml甲醇
 
平衡:5ml乙腈
 
上樣:全部待凈化液  
 
洗脫:15ml乙腈:甲醇(2:1)
 
氮吹濃縮:全部上樣液和洗脫液一起收集濃縮,在40℃下旋蒸至1ml左右,轉移至15mL離心管中,用少量乙腈潤洗旋蒸瓶3次,合并后40℃氮吹至0.5mL,用乙腈定至2mL,渦旋30s,過0.22um PVDF或PTFE濾頭后,用高效液相色譜儀配二極管陣列檢測器測定。
 
三、儀器測定條件
 
儀器:LC-5000(DAD)
 
色譜柱:C18(4.6*100mm*2.6um) 
 
流動相梯度:

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流速:1.0mL/min
 
柱溫:35 ℃
 
進樣量:5μL
 
檢測器波長:280nm 

液相色譜法具有高柱效、高選擇性、高分辨度、快速分離的特點,且其樣品和試劑消耗少。因此,此方法可以很好的實現9種抗氧化劑含量的檢測。