高壓泵是關鍵部件之一,按原理分為兩種類型:一類是恒流泵,一類是恒壓泵。恒流泵,無論色譜柱的阻力如何變化、無論外界有何影響,它輸出的流動相的流速可以基本保持不變,這正好是液相色譜儀系統工作的基本要求;而恒壓泵輸出的基本上是恒定不變的壓力,在正常情況下,由于液相色譜儀系統的阻力不會變化,所以恒壓也可以達到恒流的效果。但是由于色譜柱、溫度等可能會有變化,所以可能導致流量變化,這是HPLC使用者不希望看到的結果。所以一般來講,恒流泵比恒壓泵好(橫流泵的使用多于恒壓泵)。目前我國有近20家企業在生產各種不同類型的液相色譜儀,但是基本上都是采用恒流泵;例如:山東譜析公司的LC3000系列、北京東西電子的LC-5510、 北京瑞利公司的SY-8100 、大連依利特公司的5100、上海伍豐公司的LC100、上海儀電公司的LC210、浙江福立公司的LC1190等等儀器都是采用的高壓恒流泵輸液。
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高壓泵的質量直接影響整個儀器的質量,是用戶關注的核心部件之一。LC高壓泵的重要性及使用者對高壓泵的具體要求如下:
 
  (1)耐高壓
 
  耐高壓是液相色譜儀系統對高壓泵的基本要求之一,一般來講,平均粒徑為4μm左右的填料、內徑為5mm左右的色譜柱,當流動相流速為1-3mL/min時,要求輸液泵的最高工作壓力達到34.47-41.36Mpa(5000-6000psi);目前國際上商品液相色譜儀泵的最高工作壓力一般為41.36Mpa (5000psi)左右。但隨著填料粒徑的不斷減小,粒徑為1-2.5μm范圍的小粒徑無孔色譜填料的應用推廣,流動相在色譜柱中的阻力會更大,所以,2004年國際上出現了超高壓液相色譜,要求輸液泵能夠耐更高的壓力。目前市場上已有達到68.94Mpa(10000psi)的高壓恒流泵(如:Altex 100A)。
 
  (2)穩定性好、脈動小
 
  輸液高壓泵的穩定性和脈動大小會直接影響液相色譜儀系統的穩定性(漂移和重復性)、影響系統的噪聲、降低靈敏度,特別是HPLC系統采用電化學檢測器和示差等檢測器,或進行梯度分離時更加重要,因此目前國際上很多高壓泵的壓力脈動都可以控制在1%以內。
 
  (3) 流量連續可調、流量范圍寬
 
  目前國際上液相色譜儀的高壓泵,大多數流動范圍可以達到0.001-10.0mL/min(制備色譜的流量更大,有時要求達到數千mL/min),可以同時滿足各種不同內徑的色譜柱的分析工作要求。
 
  (4) 流量重復性好
 
  很多液相色譜儀的泵的流量重復性可以達到0.07%(RSD)。但是重復性與測試方法有關,目前國際上一般采用兩種方法測試:一是重量法,收取泵的單位時間里的流出液,在天平上直接稱其重量,判斷重復性;二是保留時間法,根據保留時間的長短,來判斷流量的重復性。在HPLC的分析工作中,其定性分析一般是根據保留時間。高壓泵的重復性(RSD)是極其重要的指標之一,也是影響液相色譜儀整機系統重復性的一項非常重要的性能技術指標。
 
  (5)死體積小
 
  高壓泵的死體積會影響LC的分析精密度和準確度,特別是影響梯度洗脫的效果,一般總是希望死體積越小越好。因為高壓泵的死體積小,有利于溶劑的快速置換,并且有利于把系統的氣泡及時排出。
 
  (6) 流量準確度高
 
  LC高壓泵的流量準確度很重要,直接影響分析測試數據的重復性(可靠性)。目前國內外HPLC的泵流量重復性一般在1%左右(與測試方法有關),最好的可達到0.06%(采用保留時間法;如美國waters、日本島津、中國譜析通用的高壓泵等就是如此)。
 
  (7) 具有梯度洗脫功能
 
  目前國際上的液相色譜儀,一般都具有梯度洗脫功能;因為,往往等度洗脫不能解決的分析工作,如果采用梯度洗脫的方法,就可能很好的解決問題。因此,HPLC的使用者,往往需要儀器的高壓泵具有流速程序和梯度洗脫程序。
 
  除上述幾點外,對液相色譜儀的高壓泵的要求還有耐用、流速可控程、具有壓力檢測保護功能、維修方便等。雖說不是所有的泵都要求具有上述要求,但是很多泵具有這些功能,一般都能滿足液相色譜分析工作的要求