鉻是人和動物必需的微量元素，鉻分為無機鉻和有機鉻。無機鉻（如硫酸鉻、三氯化鉻等）生物活性非常低，生物利用率只有0.4%～3.0%，而有機鉻的生物利用率達到10%～25%。目前市場上有機鉻主要有吡啶甲酸鉻、酵母鉻、煙酸鉻。吡啶甲酸鉻又稱吡啶羧酸鉻，是吡啶甲酸與鉻化合物的絡合物，分子式為Cr（C6H4NO2）3，分子量為418.33，系紫紅色結晶性細小粉末，流動性良好，常溫下穩定，微溶于水，不溶于乙醇。其中鉻為三價鉻，可順利通過細胞膜直接作用于組織，能增強胰島素活性，改善人體糖代謝；促進動物生長、蛋白質合成、性腺發育，提高排卵質量、繁殖性能等效果，并且毒性甚微，使用安全，目前被認為是人類最好的補鉻制劑和畜禽補鉻的理想添加劑，同時還是有機鉻中惟一得到美國國家安全認可的鉻化合物，主要應用于醫藥、保健食品和飼料添加劑。目前對吡啶甲酸鉻含量測定多見于保健食品中，對飼料中吡啶甲酸鉻的含量測定方法則鮮見報道。本研究對飼料中吡啶甲酸鉻用高效液相色譜法進行研究，方法簡便、快速、靈敏度高，適用于飼料生產企業中吡啶甲酸鉻的質量控制。
1 材料與方法
1.1 儀器與試劑
高效液相色譜儀，配置二元高壓泵、自動進樣器、紫外檢測器、色譜工作站。
吡啶甲酸鉻標準品為美國USP公司產品，純度99.9%；甲醇、乙腈均為色譜純，磷酸二氫鈉為優級純，其余試劑均為分析純。
1.2 方法
1.2.1 色譜條件 色譜柱：Waters Xbridge TM C18（5 μm，4.6 mm×250 mm），檢測波長263 nm，流動相，乙腈∶0.1 mol/L磷酸二氫鈉水溶液（用0.1 mol/L氫氧化鈉溶液調至pH=8.5）=10∶90（V/V），流速1.0 mL/min，柱溫30 ℃，進樣量10 μL，分析時間20 min。
1.2.2 標準溶液的配制 稱取吡啶甲酸鉻標準品25.0 mg置于25 mL量瓶中，加甲醇充分溶解后，用pH 8.5的水溶液（用濃度為0.1 mol/L氫氧化鈉溶液調節）定容，搖勻，吸取該溶液3 mL移入25 mL容量瓶中，用pH 8.5的水溶液定容，搖勻，備用。
1.2.3 樣品溶液的制備 稱取樣品1.250 0 g用甲醇充分溶解后，用pH 8.6的水溶液定容到25 mL容量瓶中，超聲波提取5 min，用針頭過濾器過濾，吸取該溶液1 mL至25 mL容量瓶中，用pH 8.5的水溶液定容，搖勻，備用。
2 結果與分析
2.1 檢測波長的確定
稱取吡啶甲酸鉻標樣適量，按“1.2.2” 項下配制標準溶液，于200～400 nm波長范圍內掃描，在263 nm處有最大吸收，故選263 nm為檢測波長，在該波長處檢測靈敏度較高。
2.2 流動相的選擇
對吡啶甲酸鉻進行液相色譜分析時，如采用甲醇-水流動相體系，保留時間為2.72 min[7]，分離效果明顯不如使用乙腈-磷酸鹽緩沖溶液體系，選擇了乙腈-磷酸鹽緩沖溶液作為流動相，在試驗中觀察到吡啶甲酸鉻在中性條件下有離解的現象發生，吡啶甲酸鉻在有水的環境中可轉化為吡啶甲酸和吡啶酸鉻二聚體，考慮到很多金屬離子的絡合物需在堿性條件下才能穩定，經試驗在高pH條件下樣品不再發生變化（圖2），故選定乙腈-磷酸二氫鈉水溶液（0.1 mol/L用氫氧化鈉調至pH 8.5）（10∶90，V/V）為流動相。
2.3 標準曲線制作
按“1.2.2”項配制濃度為0.08、0.10、0.15、0.20、0.25 mg/mL吡啶甲酸鉻標準溶液，在給定的儀器條件下進行液相色譜分析，測得各吡啶甲酸鉻標準溶液的相關峰面積?；貧w方程為y=78.3x-38 300.0；相關系數（R2）為0.999 7，結果表明吡啶甲酸鉻在2.5～0.8 μg范圍內色譜峰面積與進樣量呈良好的線性關系。標樣圖譜見圖2。保留時間為6.072 min。